تقنية DPO ™ هي تقنية تضخيم الأهداف المتعددة المبتكرة التي تعزز خصوصية الهدف وتقلل من التضخيم غير المحدد الذي يحدث عادة في تعدد إرسال PCR. تعيد تقنية DPO ™ إعادة تعريف PCR عالي التعدد عن طريق تمكين اكتشاف العديد من الأهداف في أنبوب واحد" وهي مناسبة تمامًا لتكنولوجيا PCR عالية التعددية في الوقت الفعلي. "
تصميم أولي مجاني مع تقنية DPO ™
التمهيدي DPO ™ يختلف هيكليا عن التمهيدي التقليدي ويتألف من جزأين فتيلة وظيفية متصلة بواسطة رابط Poly-dI. طول جزء التثبيت المستهدف بطول 5’ نهاٍ أطول من جزء محدد الهدف المستهدف بنهاية 3’. يشكل رابط Poly-dI هيكلًا يشبه الفقاعة عند درجة حرارة تصلب معينة ، ويتحكم في تفاعلات التحضير المكونة من خطوتين اللازمة لبوليميريز لتمديد التمهيدي DPO ™. باستخدام جهاز DPO ™ التمهيدي ، يكون التجليد الأولي من خلال جزء 5’ end ثم يتم التحكم في امتداد التمهيدي من خلاالقوىالأكثر تحديدًا للجزء
الخطوة 1: أول رد فعل فتيلة
الجزء 5'- نهاية أطول يرتبط بشكل تفضيلي القالب الحمض النووي ويبدأ الصلب الصلب" "."
الخطوة 2: رد فعل فتيلة الثانية
يرتبط الجزء القصير 3'- النهاية بشكل انتقائي بالموقع المستهدف ويحدد " ملحق محدد الهدف ."
خصوصية لا مثيل لها من خلال القضاء على أي تمديد كاذب
لا ينتج عن DPO ™ primer أي إشارة إيجابية خاطئة عن طريق حظر امتداد التمهيدي على القالب غير المستهدف ، وبالتالي يوفر خصوصية لا مثيل لها في PCR عالي التعددية.
أ. على الرغم من أن الجزء الأطول ذو الخمسة أعوام يرتبط بموقع غير مستهدف ، فإن الجرعة القصيرة تقاوم الامتداد غير المحدد.
باء. الجزء القصير 3’- نهاية وحده فشل في جعل فتيلة في درجة حرارة الصلب.
تعتبر تقنية DPO ™ multiplex PCR هي الطريقة الأكثر دقة وسرعة وفعالية من حيث التكلفة.
مثال
مقارنة نتائج Multiplex PCR مع التمهيدي DPO ™ مقابل التمهيدي التقليدي
التمهيدي DPO ™ القضاء على التضخيم غير محددة وأنتجت فقط العصابات الهدف الحقيقي.
ومع ذلك ، لم يزيل التمهيدي التقليدي التضخيم غير المحدد.
الاشعال التقليدية
P: العلامة الموجبة N: العلامة السالبة / الدرب 1 ~ 5: العينات
الاشعال B. DPO ™
P: العلامة الموجبة N: العلامة السالبة / الدرب 1 ~ 5: العينات