تقنية أولية مبتكرة ، ACP TM
إن ACP ™ هو نظام تمهيدي مبتكر له خصوصية PCR على الرغم من التسلسل المحدد للهدف القصير (10 bp) من التمهيدي ويقدم نتائج دقيقة فقط. يمكن العثور على ميزة ACP ™. تنشأ الميزات الرئيسية لتقنية ™ ACP من الهيكل الفريد لـ ACP ™ الذي يحتوي على منظم. منظم يتكون من رابط polydeoxyinosine. نظرًا لأن القاعدة العالمية ، إينوزين ، لها قيمة Tm أقل بكثير من تلك الموجودة في القواعد الشائعة (G و A و T و C) ، فإن الجهة المنظمة تشكل هيكلًا يشبه الفقاعة" في درجة حرارة الصلب ويزيد من خصوصية PCR عن طريق منع الربط غير محدد من التمهيدي لقالب. "
حساسية عالية وخصوصية واستنساخ
حساسية عالية
يقوم ACP ™ بتضخيم الجين المستهدف بدقة فقط حتى عند تركيزات منخفضة جدًا من القالب.
خصوصية عالية
يُظهر ACP ™ خصوصية عالية على الرغم من الحجم القصير للتسلسل المحدد الهدف (حوالي 10 نقطة في البوصة). هذا ممكن بسبب البنية الفريدة لـ ACP وإجراء PCR على مرحلتين.
استنساخ عالية
يوفر ACP ™ إمكانية استنساخ بنسبة 99٪.
مقارنة بين التمهيدي القصير / الطويل و ACP™ ؛ التمهيدي
يحتوي ACP ™ على منطقتين أساسيتين نظرًا لهيكلهما وعائدات الامتداد فقط عندما يتم مطابقة جزأين الأساسيين (3’القطعة و 5’القطعة) تمامًا بتسلسل القالب.
في حالة تسلسل الهدف من 10 mer
المسار 1: الاشعال المحدد للهدف القصير (10 ~ 14 نقطة أساس) ، والذي يتطلب درجة حرارة منخفضة للتضخيم ، لا ينتج منتجًا مستهدفًا.
حارة 2: للحصول على درجة حرارة الصلب العالية المطلوبة لخصوصية عالية من PCR ، يتم ربط ذيل التسلسل العالمي في بعض الأحيان إلى الاشعال محددة الهدف قصيرة. ومع ذلك ، فإن هذا ينتج في كثير من الأحيان منتجات خاطئة بسبب وجود تسلسل عالمي.
المسار 3: يسمح الهيكل الفريد لـ ACP ™ بتضخيم الجين المستهدف فقط في بروتوكول خطي PCR سريعين يسمح بدرجات حرارة صلبة عالية.
＊ Lane1: التمهيدي القصير (الهدف فقط 10 mer) / Lane2: التمهيدي الأطول (الهدف 10 mer + tail) / Lane3: ACP (10 mer + منظم + الذيل) / M: 100bp حجم العلامة
في حالة التسلسل المستهدف لـ 19 mer
بالإضافة إلى PCR العشوائي مع بادئات تسلسل محددة لهدف قصير ، يوفر ACP ™ نتائج PCR أفضل من بادئات PCR التقليدية (19 نقطة أساس تسلسل محدد) في PCR عادي.
＊ Lane1: التمهيدي (الهدف فقط 19 mer) / Lane2: ACP (19 mer + منظم + الذيل) / M: 100bp حجم علامة